Treponema pallidum, антитела

Сифилис: виды диагностических методик и их особенности

Чтобы обнаружить сифилис существует немало диагностических методик.

Каждая из них имеет характерные особенности и нюансы.

Метод микроскопии

Анализ позволяет обнаружить в исследуемом образце биоматериала бледную трепонему – возбудителя сифилиса.

Для исследования:

• делают соскоб с поверхности твердого шанкра и вторичного сифилида, потому что именно здесь, бледные трепонемы находятся в больших концентрациях;
• проводят пункцию лимфоузла, ликвора или околоплодных вод.

Методика не позволяет снимать диагноз из-за слабой чувствительности.

Появление ложноотрицательных результатов может быть обусловлено следующими факторами:

• нарушением взятия биоматериала, повлекшим отсутствие или недостаточную концентрацию патогенов в исследуемом образце;
• прием антибактериальных препаратов, как внутрь, так и местно. В этом случае бледная трепонема может также отсутствовать в исследуемом биоматериале.

В целом микроскопия может давать ложноотрицательные результаты примерно в тридцати процентах случаев.

По причине высокой специфичности методика имеет право на существование.

ПЦР-исследование

Методика позволяет идентифицировать генетический материал возбудителя.

Поэтому анализ характеризуется высокой точностью и достоверностью.

Ели ПЦР исследование взятого с поверхности высыпаний образца биоматериала показывает отрицательные результаты на бледную трепонему, то, скорее всего, сифилиса у пациента нет.

В этом случае, грамотный специалист, должен дать оценку состоянию здоровья пациента, в комплексе с имеющейся клиникой.

Если имеющиеся проявления имеют характерные признаки заболевания и не соответствуют полученным данным, то обследование пациента необходимо продолжить.

Серологические реакции

Они могут быть трепонемные и нетрепонемные.

Каждая из методик направлена на обнаружение антител к возбудителю сифилиса.

Интерпретация результатов анализов требует высокого профессионализма врача, т.к. встречаются сложные формы инфицирования.

Нетрепонемные анализы

В основе каждой из методик лежит поиск антител.  Но, после заражения анализы остаются отрицательные на протяжении длительного периода из-за отсутствия антител.

Сколько пройдет времени пока в крови появятся антитела?

Примерно через пару недель появятся IgM, а спустя четыре или шесть недель – IgG.

То есть от начала заражения должно пройти, как минимум, 2-3 недели.

Иммуноглобулины начинают синтезироваться у разных людей через разные промежутки времени.

У одних раньше, у других позже.

Может ли быть у одного партнера анализ на сифилис отрицательный, а у другого – положительный?

Этот вопрос, который часто задают пациенты, требует однозначного ответа: «Да, такое бывает, даже в том случае, когда методы диагностики одинаковые».

Нетрепонемные методики, обычно, используют при скрининговых исследованиях.

Они отличаются быстротой исследования, простотой постановки и дешевизной.

Трепонемные методики относят к уточняющим видам диагностики. Это: РИФ, РИТ, ИФА и другие разновидности тестов. Главным отличием от нетрепонемных методик является использование для анализа клеточной стенки возбудителей. В качестве мишени используют противосифилитические иммуноглобулины М и G.

Трепонемные тесты характеризуются высокой достоверностью и специфичностью.

Из-за дороговизны их применяют только с целью уточнения диагноза и в качестве контрольных тестов.

Реакции иммунной системы организма при заражении сифилисом

Сифилис — это инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (бактерией Treponema pallidum). Организм человека, заболевшего сифилисом, защищается от возбудителя заболевания с помощью механизмов иммунитета. Проникновение, длительное сохранение в организме (персистенция) и размножение возбудителя заболевания в организме хозяина приводят к выраженным изменениям со стороны иммунной системы. 

После попадания бледных трепонем в организм и при их дальнейшем размножении, в организме больного человека происходят иммунные сдвиги. Механизм иммунного ответа при сифилисе исследован не полностью, однако имеются достаточно убедительные данные о том, что в этом процессе участвуют все звенья иммунной системы. 

Активируются механизмы как врожденного неспецифического иммунитета, свойственного человеку как биологическуому виду, так и адаптивного, антиген-опосредованного иммунного ответа, вызванного контактом с антигеном. В иммунном ответе организма принимают участие как клеточные (макрофаги, Т-лимфоциты), так и гуморальные механизмы (синтез специфических иммуноглобулинов — антител).

Иммунную реакцию вызывают белки, входящие в состав структур бледной трепонемы; они являются чужеродными веществами для организма человека и относятся к антигенам. Все антигены трепонемы способны стимулировать организм больного вырабатывать антитела соответствующих классов. Вследствие этого, в сыворотке крови больных сифилисом отмечается множественность антител: протеиновых, комплементсвязывающих, полисахаридных реагинов, иммобилизинов, агглютининов. 

Классы вырабатываемых антител меняются на разных этапах течения сифилиса — в различных стадиях болезни преобладают то одни, то другие антитела, относящиеся к разным классам иммуноглобулинов. Сила иммунного ответа и спектр антител, выявляемых на разных стадиях развития инфекции, зависит от особенностей организма у данного человека. 

У больных вторичным и третичным сифилисом отмечаются признаки микробзависимой супрессии иммунитета. 

Сифилис принадлежит к инфекциям, хроническое течение которых вступает в несоответствие с выраженным иммунным ответом на антигены возбудителя. Иными словами, «иммунитет» (т.е. резистентность к инфекции) и «иммунные сдвиги» при сифилисе не совпадают, а иногда и противоречат друг другу.

Во многих случаях иммунологический ответ не предотвращает поэтапного развития инфекции. Организм хозяина неспособен уничтожить сифилитическую инфекцию, что приводит к дальнейшей эволюции патологического процесса. Болезнь, начавшись с местного процесса, распространяется на весь организм и продолжается много лет.

Повторный анализ при положительном результате на сифилис

При получении положительного результата в случае появления сомнений в его точности, показано повторное проведение исследования.

Поэтому, таким пациентам, подробно разъясняют, как правильно подготовиться к сдаче анализов.

При взятии соскоба из шанкра, пациентам рекомендуют:

• не проводить обработку антисептиками и антибиотиками очагов поражения;
• перед взятием биоматериала исключить употребления напитков, содержащих алкоголь;
• подобрать одежду таким образом, чтобы она не касалась образований и не оказывала на них трения.

Если пациенту назначен анализ крови, то требования к ее взятию стандартные:

• биоматериал сдается натощак;
• забор крови делают в утренние часы;
• перед сдачей крови исключить эмоциональные и физические нагрузки.

Описание

Диагностика сифилиса Т. pallidum определение IgМ и IgG кач. — специфический трепонемный тест, выявляющий антитела к антигенам Treponema pallidum.
По приказу Минздравсоцразвития РФ специфический серологический тест на трепонему обязателен при обследовании больных на сифилис.
Данное исследование рекомендуется проводить совместно с дополняющим его исследованием — диагностика сифилиса RPR.Сифилис — инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой (Treponema pallidum), передающееся в основном половым путем, склонное к хроническому течению и поражающее большинство органов и систем организма. Сифилис характеризуется медленным прогрессирующим течением. На поздних стадиях он может приводить к тяжелым поражениям нервной системы и внутренних органов.Клиническая картина при сифилисе
Клинические проявления сифилиса очень разнообразны и зависят от стадии заболевания. Выделяют несколько стадий сифилиса. Первичная стадия наступает примерно через 2–3 недели после заражения. На этой стадии проявляются одна или иногда несколько язв, называемых шанкром, как правило, на той части тела, которая контактировала с шанкром больного человека, например пенисом или влагалищем. Во многих случаях твердый шанкр безболезненный и остается незамеченным, особенно если он находится в прямой кишке или на шейке матки. Шанкр исчезает через 4–6 недель.
Вторая стадия заболевания начинается через 2–8 недель после возникновения твердого шанкра. Она характеризуется появлением сыпи, чаще на ладонях и подошвах. Иногда встречаются и другие симптомы, к примеру лихорадка, усталость, опухание лимфатических узлов, боль в горле и ломота в теле.
Сифилис способен протекать в скрытой форме, во время которой у инфицированного человека не проявляется никаких симптомов, но в то же время он продолжает оставаться носителем инфекции. Это может длиться годами.
Без лечения примерно у 15% больных развиваются симптомы позднего, или третичного, сифилиса. Эта стадия иногда длится несколько лет и приводит к психическим заболеваниям, слепоте, неврологическим проблемам, болезням сердца и даже к смерти.
От сифилиса можно избавиться с помощью антибиотиков (предпочтительно применять производные пенициллина). Причем на ранней стадии заболевание лечится легче и быстрее.
При контакте человека с Treponema pallidum, его иммунная система вырабатывает антитела к бактерии. В крови могут быть обнаружены два вида таких антител: IgM и IgG.Антитела класса IgM
Антитела класса IgM вырабатываются организмом в первую очередь. Они выявляются в сыворотке крови в конце второй недели заболевания и исчезают у нелеченых больных примерно через 1–1,5 года, при лечении раннего сифилиса — через 3–6 мес., позднего — через год. Они присутствуют у большей части пациентов с первичным и вторичным сифилисом, поэтому тест на IgM может быть использован для различения давней инфекции от только приобретенной.
Специфических трепонемных антител IgM нет у лечившихся в прошлом пациентов, но их отсутствие само по себе не говорит об эффективности проведенной терапии, поскольку у большинства из тех, кто не лечился, в скрытой стадии сифилиса IgM-антитела тоже отсутствуют.Антитела класса IgG
Антитела класса IgG появляются в крови через 3–4 недели после инфицирования. Концентрация их нарастает и достигает максимума на 6-й неделе, в этот момент их концентрация преобладает над концентрацией IgM. Иммуноглобулины класса G на определённом уровне сохраняются длительное время, иногда пожизненно.Показания:

• подготовка к беременности;
• диагностика врождённого сифилиса;
• сомнительные сексуальные связи;
• подготовка к оперативному вмешательству;
• донорство (заготовка и переливание крови и её компонентов);
• в комплексе лабораторного подтверждения диагноза сифилиса.

Подготовка
Кровь рекомендуется сдавать утром, в период с 8 до 12 часов. Взятие крови производится натощак, спустя 4–6 часов голодания. Допускается употребление воды без газа и сахара. Накануне сдачи исследования следует избегать пищевых перегрузок.Интерпретация результатов
Единицы измерения: тест качественный. Результаты выдаются в терминах «положительно», «отрицательно» или «сомнительно».Положительный результат:Отрицательный результат:

• отсутствие инфицирования;
• ранний первичный сифилис.

Сомнительный результат:

Особенности течения

• Первичная (язва кожи). После инкубационного периода бактерии в организме появляется ярко выраженный оранжево-красный бугорок (очаг поражения) на вульве, шейке матки, половом члене, в области заднего прохода или прямой кишки. Кроме того, может наблюдаться также увеличение лимфатических узлов в паху. Через несколько дней очаг поражения превращается в язву, которая спустя некоторое время полностью заживает даже без медикаментозного лечения.
• Вторичная (лихорадка и сыпь). У ¼ больных первичное поражение остается активным, и начинается вторая стадия заболевания. Признаки сифилиса у мужчин и женщин: появляются высыпания на коже, увеличиваются лимфатические узлы в разных местах тела. Очаги видны на подошвах ног и кистях рук в виде очагов поражения или волдырей. Цвет сыпи красно-розовый, и она не зудит. В дополнение к этим симптомам могут также возникать такие симптомы, как лихорадка, головная боль, слабость, желтуха, анемия и в крайних случаях менингит. В течение первых 2-х лет со дня заражения сифилисом кожные поражения проходят и появляются вновь попеременно. Через два года никаких признаков не остается, и болезнь становится латентной.
• Третичная (повреждение внутренних органов). Болезнь поражает сердце и кровеносные сосуды, кожу и центральную нервную систему. На коже появляются очаги поражения с некрозом или с характерным шелушением (могут также появиться в горле, небе и носу), оставляющие рубцы и вызывающие перфорацию в носовой перегородке. Со стороны центральной нервной системы могут проявляться такие симптомы, как спутанность сознания, менингит, судороги и т. д. При поражении спинного мозга образуется паралич ног и рук, разрушаются задние столбы спинного мозга. В сердце и кровеносных сосудах образуются расширения, а в коронарных артериях – стенозы.

Как передается сифилис?

Основной путь передачи — половой. Сифилис может передаваться при вагинальном, анальном и оральном сексе. Возбудитель сифилиса проникает в сперму, поэтому человек может быть заразен даже при отсутствии видимых высыпаний на теле или в области половых органов. Также сифилис передается через кровь при переливании от зараженного донора или использовании нестерильных/общих шприцев.

Реже передается бытовым путем через зубные щетки, бритвы, маникюрные инструменты. Еще реже — через посуду и общие полотенца. В слюне возбудитель появляется только при наличии высыпаний во рту. Бледная трепонема довольно быстро гибнет во внешней среде, поэтому случаи бытового заражения встречаются редко и требуют тесного и длительного контакта с больным.

Медицинский персонал может заразиться при случайном ранении инфицированными инструментами или через микротравмы кожи при контакте с инфицированной кровью.

Сифилис передается от матери к ребенку внутриутробно и очень опасен для беременных. Также возбудитель проникает в грудное молоко и может передаваться ребенку при кормлении грудью даже при отсутствии видимых высыпаний на груди.

Медицинские офисы KDLmed

• КЛИНИКА 1
• КЛИНИКА 2
• КЛИНИКА 3

АДРЕС:г. Пятигорск, проспект 40 лет Октября, 62/3

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 14:00 / вс 8:30 — 13:00
Взятие крови: пн-сб 7:30 — 12:00
вс 8:30 — 12:00
Взятие мазка: пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 13:30 / вс 8:30 — 12:00

ТЕЛЕФОН:(8793) 330-640
+7 (928) 225-26-74

АДРЕС:г. Пятигорск, проспект 40 лет Октября, 14

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 14:00 / вс 8:30 — 13:00
Взятие крови: пн-сб 7:30 — 12:00
вс 8:30 — 12:00
Взятие мазка: пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 13:30 / вс 8:30 — 12:00

ТЕЛЕФОН:(8793) 327-327
+7 (938) 302-23-86

АДРЕС:г. Пятигорск, ул. Адмиральского, 6А

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 14:00
Взятие крови: пн-сб 7:30 — 12:00
Взятие мазка: пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 13:30

ТЕЛЕФОН:(8793) 98-13-00
+7 (928) 363-81-28

АДРЕС:г. Ставрополь, ул. Ленина, 301

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 15:00
сб 7:30 — 14:00 / вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(8652) 35-00-01
+7 (938) 316-82-52

• КЛИНИКА 1
• КЛИНИКА 2

АДРЕС:г. Невинномысск, ул. Гагарина, 19

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 15:00
вс 8:30 — 14:00

ТЕЛЕФОН:(86554) 7-08-18
+7 (928) 303-82-18

АДРЕС:г.Невинномысск, ул. Гагарина, 60

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:8 (86554) 6-08-81
8 (938) 347-42-17

АДРЕС:г. Нефтекумск, 1-й микрорайон, ул. Дзержинского, 7

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86558) 4-43-83
+7 (928) 825-13-43

АДРЕС:г. Буденновск, пр. Энтузиастов, 11-Б

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00
вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86559) 5-55-95
+7 (938) 302-23-89

АДРЕС:г. Зеленокумск, ул. Гоголя, д.83

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00
вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86552) 6-62-14
+7 (938) 302-23-90

АДРЕС:г. Минеральные Воды, ул. Горская, 61, 13/14

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 16:00 / вс 8:30 — 15:00

ТЕЛЕФОН:(87922) 6-59-29
+7 (938) 302-23-88

• КЛИНИКА 1
• КЛИНИКА 2

АДРЕС:г. Ессентуки, ул. Володарского, 32

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 14:30 / вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(87934) 6-62-22
+7 (938) 316-82-51

АДРЕС:г.Ессентуки, ул.Октябрьская 459 а

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 15:00
сб 7:30 — 14:30

ТЕЛЕФОН:(87934) 99-2-10
+7 (938) 300-75-28

АДРЕС:г. Георгиевск, ул. Ленина, 123/1

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 14:00 / вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(87951) 50-9-50
+7 (938) 302-23-87

АДРЕС:г. Благодарный, ул. Первомайская, 38

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 15:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86549) 24-0-24
+7 (928) 363-81-37

АДРЕС:г. Светлоград, ул. Пушкина, 19 (Центр, Собор)

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 15:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86547) 40-1-40
+7 (928) 363-81-41

АДРЕС:с. Донское, ул. 19 Съезда ВЛКСМ, 4 А

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86546) 34-330
+7 (928) 363-81-25

АДРЕС:г. Новоалександровск, ул. Гагарина, 271 (пересечение с ул. Пушкина)

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:8(86544) 5-46-44
+7 (928) 363-81-45

АДРЕС:с. Александровское, ул. Гагарина, 24

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 15:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86557) 2-13-00
+7 (928) 363-81-35

АДРЕС:с. Кочубеевское, ул. Братская, 98 (ТЦ «ЦУМ»)

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 13:00
сб 7:30 — 13:00
вс 8:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86550) 500-22
+7 (928) 363-81-42

АДРЕС:г. Железноводск, ул. Ленина, 127

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 17.30
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(87932) 32-8-26
+7 (928) 363-81-30

АДРЕС:с. Арзгир, ул. Кирова, 21 (Рынок)

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 14:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:(86560) 31-0-41
+7 (928) 363-81-44

АДРЕС:г.Ипатово, ул. Ленинградская, 54

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:8 (86542) 5-85-15
8 (938) 347-42-16

АДРЕС:ст. Ессентукская, ул. Павлова, 17

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 16:00
сб 7:30 — 14:30

ТЕЛЕФОН:8 (87961) 6-61-00
8 (938) 347-42-18

АДРЕС:ст. Курская, ул. Калинина, д. 188

ВРЕМЯ РАБОТЫ:пн-пт 7:30 — 18:00
сб 7:30 — 13:00

ТЕЛЕФОН:8(87964) 5-40-10
8(938) 347-43-29

• Пятигорск
• Ставрополь
• Невинномысск

• Нефтекумск
• Буденновск
• Зеленокумск

• Минеральные Воды
• Ессентуки
• Георгиевск

• Благодарный
• Светлоград
• Донское

• Новоалександровск
• Александровское
• Кочубеевское

• Железноводск
• Арзгир
• Ипатово

• Ессентукская
• Курская

Сифилис — это же откуда-то из романов Бабеля, разве им сейчас кто-то еще болеет?

К сожалению — да, болезнь актуальна и сейчас.

Сифилис сопровождает человечество многие столетия: описания этой болезни есть в трактатах XV–XVI веков, а следы характерных поражений костей встречаются и в более ранних раскопках. До открытия эффективных антибиотиков сифилис был неизлечимым заболеванием, неминуемо приводящим к смерти. А его переход из разряда смертельных в разряд излечимых болезней в том числе рассматривают как один из факторов сексуальной революции 60–70-х годов XX века. К этому моменту основные ИППП научились лечить, а с ВИЧ человечество еще не столкнулось.

Несмотря на успехи лечения и существенное снижение заболеваемости, сифилис все еще остается достаточно распространенной инфекцией с периодическими вспышками. Например, в России большой всплеск наблюдался во второй половине 90-х и в начале 2000 годов. Это было связано с сексуальной революцией постсоветского времени в сочетании с огромными пробелами в сексуальном просвещении людей и, как следствие, недостаточным использованием презервативов. Говоря грубо, сексом начали заниматься все, но вот как это делать безопасно — понимали немногие.

В настоящее время локальным вспышкам сифилиса способствует в том числе распространение доконтактной профилактики ВИЧ (ДКП, PrEP). Некоторые люди, принимая ДКП, могут почувствовать себя «неуязвимым» перед ВИЧ и ИППП и начать пренебрегать использованием презервативов

Важно помнить, что ДКП снижает риск передачи только ВИЧ, при этом любой другой ИППП человек по-прежнему может заразиться

По оценке ВОЗ за 2016 год, в мире ежегодно заболевали сифилисом порядка 6 миллионов человек. В России за 2019 год заболеваемость составляла порядка 15 случаев на 100 тыс. населения, в абсолютных цифрах это около 22 тысяч заболевших за год.

Возбудитель сифилиса — бледная трепонема (Treponema pallidum), бактерия из семейства спирохет.

Динамика антител при развитии заболевания.

В серодиагностике сифилиса пользуются сочетанием как минимум двух тестов, основанных на выявлении антител против кардиолипиновых и трепонемных антигенов. Это дает возможность следить за развитием инфекции, начиная с 7—10-го дня после первых симптомов сифилиса (шанкра), т.е. спустя 3—5 недель после заражения. 

Целесообразность сочетанного применения кардиолипиновых и трепонемных тестов связана с тем, что динамика их показателей в ходе инфекционного процесса и лечения неодинакова. Так, при первичном сифилисе кардиолипиновые тесты положительны в 60—80% случаев; во вторичном периоде их чувствительность достигает 100%, но затем она постепенно падает, так что около 30% больных третичным сифилисом становятся серонегативными. 

Антитрепонемные антитела более стабильны, и их обнаружение может быть единственным признаком латентного сифилиса. 

Лабильность антикардиолипиновых антител делает их чувствительным индикатором эффективности лечения: если трепонемные тесты долго остаются положительными после успешной терапии, то реакции с кардиолипином обычно угасают через несколько месяцев после элиминации трепонем. Поэтому длительная серопозитивность кардиолипиновых тестов с высокой вероятностью указывает на сохранение инфекции в организме. 

Пластичность кардиолипиновых тестов связана с природой антикардиолипиновых антител. В своем большинстве они относятся к IgM, поэтому их синтез не поддерживается клетками иммунологической памяти, прекращаясь после элиминации антигенов. При реинфицировании кардиолипиновые тесты вновь становятся позитивными, отражая реакцию на новое внедрение возбудителя. 

Исследования бледной трепонемы методами протеомики и функциональной геномики

Исследования особенностей бледной трепонемы в течение долгого времени были затруднены из-за  невозможности длительного культивирования патогенных штаммов T. pallidum на искусственных средах. Это же служило препятствием для изучения иммунологических и физико-химических свойств большинства белков, входящих в структуру T. pallidum.

После расшифровки генома возбудителя сифилиса, осуществленного группой американских исследователей в 1998 году, произошел качественный скачок в области изучения бледной трепонемы, как и многих других микроорганизмов, геномы которых были расшифрованы в начале 90-х годов. Если раньше изучением структуры, функций и механизмов работы отдельных наборов генов занималась классическая генетика, то возникшая как область знаний геномика стала изучать огромные объемы данных о последовательностях нуклеотидов, полученные в результате исследований ДНК. 

Хотя наличие данных по геному — это настоящая сокровищница информации для исследователей, однако геномные последовательности дают только «взгляд с высоты птичьего полёта» на биологические процессы, свойственные микроорганизмам. Рекордное обилие сведений по ДНК, которое нарабатывается методами современной геномики становится основанием для глобальной экспериментальной платформы — протеомики. Современные глобальные методы протеомики сочетают компьютерные и биологические подходы. 

Протеомика — современное направление молекулярной биологии, занимающееся сравнительным изучением белков, которые могут быть экспрессированы микроорганизмом в определенную фазу жизнедеятельности, предсказанием функциональной роли отдельных белков путем экспериментального сопоставления их качественного и количественного составов в разных клетках, а также установлением взаимосвязи структуры белка и его функций. 

Благодаря развитию методов протеомики стало возможным широкомасштабное изучение белкового состава различных организмов, в том числе и возбудителя сифилиса. 

Состав белков T. pallidum в настоящее время изучается методами протеомики и функциональной геномики, что значительно расширило знания об антигенной структуре микроорганизма. С использованием протеомных методов исследования было выявлено и охарактеризовано более сотни новых иммуногенных белков T. pallidum. В частности, появилась серия работ по изучению протеома возбудителя сифилиса с целью выявления новых белков, представляющих интерес для создания вакцины или диагностикумов на их основе.

Недостаток этого подхода в том, что вычислительные программы могут предсказать белковый состав трепонем, но не позволяют определить расположение белка в клетке.

Основополагающими исследованиями в этой области стали работы М. Brinkman и соавт. (2006), которые провели серологический скрининге библиотеки рекомбинантных белков T. pallidum. Серологический скрининг нативных белков, разделенных методом двумерного электрофореза, был представлен в работе М. McGill и соавт. (2010).

Способы получения достоверного результата при сифилисе

Как считают некоторые специалисты, наиболее точные результаты будут получены при проведении ПЦР или микроскопии образца пунктата, полученного из регионарных лимфатических узлов.

Проведение подобной диагностики позволяет получить достоверный результат уже через несколько дней после инфицирования.

В результате доктор сможет быстрее поставить правильный диагноз и назначить лечение пациенту.

Подобный вид диагностики актуален при наличии атипичных форм патологии.

При заражении оральным путем, спустя несколько дней уже происходит увеличение подчелюстных лимфоузлов.

Взятие пунктата и изучение его в лаборатории позволит в максимально короткие сроки провести диагностику.

Методика является инвазивной, сложной в исполнении и не всегда эффективной.

Анализы после лечения сифилиса

До сих пор лечение сифилиса проводится антибиотиками пенициллиновой группы.

Препараты для уничтожения бледной трепонемы подбираются индивидуально для каждого пациента.

В процессе терапии и после окончания курса сдаются контрольные анализы, чтобы лечащий врач мог оценить адекватность назначенного лечения.

Внешние проявления заболевания на фоне правильно подобранных средств терапии проходят достаточно быстро.

Поэтому при получении первых отрицательных анализов нельзя отказываться от приема лекарств и проведения повторной диагностики, так анализы могут оказаться ложноотрицательными.

В этом случае увеличивается риск развития рецидива.

Периодичность проведения контрольных анализов зависит от формы патологии, давности процесса и других факторов.

Можно ли сделать быстрее анализы, чтобы подтвердить выздоровление?

Например, пациентам, у которых сифилис был пролечен на этапе первой стадии, зачастую достаточно после окончания лечения провести два трепонемных теста.

Если они окажутся отрицательными, то пациент считается здоровым.

Периодичность их проведения составляет три и шесть месяцев после приема последней дозы антибиотика.

Геном бледной трепонемы

Так как бледная трепонема весьма важна с медицинской точки зрения, и не поддается культивированию на искусственных средах, то она стала одним из первых микроорганизмов, чей геном расшифровали исследователи. Для секвенирования был выбран штамм Nichols, выделенный в США еще в 1912 году. Геном микроорганизма представлен кольцевой двуцепочечной молекулой ДНК размером 1 138 006 пар оснований. ДНК содержит 1041 предсказанную кодирующую последовательность. Впоследствии были полностью секвенированы еще несколько штаммов T. pallidum. Ученые выяснили, что геномы штаммов отличаются, хотя и не очень значительно. 

У микроорганизма идентифицировано 42 семейства генов, ответственных за основные жизнеобеспечивающие функции: механизмы репликации ДНК, транскрипции, трансляции, энергетический метаболизм, процессы клеточного деления и секреции белков. 

Наличие небольшого генома с лимитированием процессов биосинтеза объясняет некоторые свойства этой бактерии. Помимо своего небольшого размера, геном бледной трепонемы имеет еще и другие своеобразные черты в виде повторяющихся генов или генов с внутренними  повторами.  

После расшифровки генома трепонем было выяснено, что 55% генома бледной трепонемы — это гены с предсказанной биологической ролью, 28% — ранее неизвестные гены и 17% генов не уникальны для T. pallidum, т.е. соответствуют белкам других видов бактерий. 

Важную роль в жизнедеятельности возбудителя сифилиса играет транспорт необходимых питательных веществ из окружающей среды. Этим объясняется присутствие широкого спектра транспортных белков с большим выбором субстратных специфичностей, кодируемых 5,7 % генома. Транспортные белки — это переносчики, связывающиеся с соответствующими субстратами внешней среды и транспортирующие их от наружной мембраны к цитоплазматической.

Как высокоспециализированный патоген, Т. pallidum не имеет в своем геноме генов, отвечающих за синтез ферментов, расщепляющих жирные кислоты, она использует сахара, содержащиеся в жидких средах организма хозяина. В качестве источников энергии микроорганизм использует глюкозу, галактозу, мальтозу и глицерин. Пути использования аминокислот как источника углерода и энергии в настоящее время не известны. Предполагают, что Т. pallidum не способна использовать аминокислоты как альтернативный источник энергии. 
Одной из важнейших функций Treponema pallidum является движение, что обусловливает ее высокую инвазивность и возможность распространяться по жидкостям организма: внутрисуставной, глазной, экстрацеллюлярном матриксе и в коже. Двигательная активность обеспечивается 36 генами, кодирующими белки жгутиковых структур.

Динамика образования специфических антител у больного при сифилисе

По данным современных исследований, гуморальный ответ при сифилисе происходит в соответствии с общими закономерностями для бактериальных инфекций. Вначале вырабатываются иммуноглобулины класса M против наиболее иммуногенных и специфичных антигенов возбудителя. Специфические антитела класса M способны выявляться в крови пациентов, инфицированных T. pallidum, на самых ранних этапах развития инфекции, уже через 1,5-2 недели после заражения, что клинически соответствует скрытому инкубационному периоду заболевания. При первичном и вторичном сифилисе содержание указанных антител в крови больных быстро нарастает и сохраняется на высоком уровне; максимальное их содержание у больных сифилисом приходится на 6—9-ю неделю заболевания.

После успешного лечения антибактериальными препаратами специфические IgM у больных относительно быстро элиминируют из кровотока (через 3—12 месяцев). При лечении раннего сифилиса IgM исчезают через 3-6 месяцев, позднего – через 1 год. Большое диагностическое значение приобретает выявление антитрепонемных антител IgM в крови новорожденных. Так как IgM не проходит через плаценту, выявление антитрепонемных IgM-антител у новорожденного указывает на врожденный сифилис. Точно так же IgM-антитела не проникают через гематоэнцефалический барьер, и их появление в спиномозговой жидкости говорит о нейросифилисе.

Многие лабораторные методики диагностики сифилиса основаны именно на выявлении трепонемоспецифических IgM.  Например, иммуноферментный анализ (ИФА) на твердой фазе и линейный иммуноблоттинг (ИБ) на микропористых стрипах с использованием антивидовых конъюгатов на основе моноклональных антител к тяжелой мю-цепи в структуре IgМ человека, а также реакция непрямой иммунофлюоресценции (РИФ) с исследованием 19S-фракции сыворотки крови, содержащей тяжелые IgМ.

Раннее определение специфических IgM также может быть применено для своевременного выявления случаев раннего врождённого сифилиса (определение специфических IgM в крови новорожденных) или случаев реинфекции у пациентов, ранее перенесших сифилис.

Без лечения, по мере развития болезни и разрешения клинических проявлений вторичного периода, уровень специфических IgМ в крови больных сифилисом постепенно понижается и начинает преобладать синтез IgG. Развитие иммунного ответа на антигенную стимуляцию в организме больного сифилисом сопровождается постепенным переключением с синтеза антител класса M на продукцию более мелких молекул иммуноглобулинов класса G.

Специфические иммуноглобулины класса G в кровотоке больных сифилисом появляются более поздно, в конце 3-й или на 4-й неделе после заражения и, как правило, достигают более высоких титров, чем IgM. Уже на 6 неделе после инфицирования уровень IgG преобладает над уровнем IgM и может сохраняться в таком состоянии годы. 

Содержание специфических IgG, постепенно увеличиваясь, достигает максимальной выраженности через 1—1,5 года, после чего несколько снижается, подвергаясь волнообразным колебаниям в зависимости от активности инфекционного процесса. Количество специфических IgG в циркулирующей крови после адекватно проведенного лечения снижается медленно. Антитела этого класса могут сохраняться даже после клинического излечения пациента в течение десятков лет или пожизненно.

Кроме перечисленных видов антител, в гуморальном иммунитете при сифилисе принимают участие иммуноглобулины класса А. Антитела IgA вырабатываются в сравнительно небольших количествах. Вопрос о синтезе IgE и IgD в настоящее время изучен недостаточно.